SOX9促进人脐带间充质干细胞聚集增强其向软骨分化的潜能

被引:6
作者
许运 [1 ]
陈亮 [2 ]
史勇 [1 ]
顾勇 [2 ]
邹俊 [2 ]
黄晨 [2 ]
唐天驷 [2 ]
机构
[1] 江苏省 苏州市相城人民医院骨科
[2] 苏州大学附属第一医院骨科
关键词
软骨形成; 干细胞; 病毒; SOX9基因;
D O I
暂无
中图分类号
R329.2 [人体细胞学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的探讨转录因子SOX9对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC:s)成软骨细胞分化潜能的影响。方法分离培养鉴定hUC-MSCs,SOX9慢病毒载体转染hUC-MSC:s后检测转染效率,Mrrr法检测细胞增殖。SOX9转染后软骨诱导培养2l d,观察细胞形态变化,逆转录一聚合酶链反应、免疫印迹试验、免疫荧光、阿利新兰染色进行软骨分化评价,并检测I、X型胶原以及细胞黏附分子N-cadhelin的表达。结果培养的hUC-MSC:s经流式细胞仪检测示CrD29(95.9%),CI44(96.5%),CD90(98.9%),CDl05(94.3%)阳性,CID34(3.0%),CI45(2.6%)阴性,有成骨及成脂分化能力。转染48 h后观察到绿色免疫荧光蛋白(GFP)表达,转染效率>90%,P>0.05;基因转染对hUC-MSC:s的增殖无明显影响。Lenti-GFP-SOX9转染的hUC-MSC:s在单层培养下出现白发性细胞聚集,并形成较大的软骨结节。SOX9明显上调了N-cadherin的表达,促进hUC-MSC:s产生聚集,增加Ⅱ型胶原、Aggrec:an的表达水平,抑制了I、X型胶原的表达。结论 SOX9促进人脐带间充质干细胞聚集增强其向软骨分化的潜能。
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