Smad3介导补肾中药对增龄成骨细胞VDR mRNA表达的影响

目的:探讨smad3是否介导了补肾中药对增龄成骨细胞VDR mRNA表达的影响,从而阐明补肾中药具有促进骨形成的机制。方法:分离6月龄和16月龄SD大鼠成骨细胞,采用组织块翻转方法培养,通过倒置显微镜观察细胞形态,并以矿化结节染色对成骨细胞加以鉴定。将SD大鼠随机分为正常组、生理盐水组、单味补阳组(固本壮骨粉)、复方补阳组(金匮肾气丸)、复方平补组(补肾益精方)、复方补阴组(知柏地黄丸)和西药对照组(阿法骨化醇片),制备药物血清;当成骨细胞汇合达60%,换无血清培养液培养细胞24 h后,加入含药血清(浓度为10%)再继续培养3 d。采用RT-PCR方法检测含药血清干预后成骨细胞smad3和VDR mRNA的表达。结果:在增龄成骨细胞smad3 mRNA表达是下降的,这与增龄所致VDR mRNA表达下降相一致;单味补阳组、复方补阳组和西药对照组上调smad3 mRNA的趋势与它们上调VDR mRNA的趋势相一致。结论:补阳中药可能通过启动Smad3 mRNA表达而上调VDR mRNA表达,从而促进骨形成。