大鼠肺缺血再灌注损伤中肺泡细胞凋亡的动态观察

目的　研究大鼠肺缺血再灌注损伤 (IR)中肺泡细胞凋亡的动态过程及其与肺损伤的相关性。方法　采用大鼠单肺原位热缺血再灌注模型。于缺血再灌注 0min、30min、1h、2h、6h及 12h采取肺组织及左房血标本 ,测定血氧分压、肺组织湿 /干重比 ,并作光镜和透射电镜观察组织、细胞形态及亚显微结构 ,确定凋亡发生。TUNEL法测定肺组织中凋亡指数。台盼蓝活体染色评价细胞死亡程度 ,并结合同组凋亡水平间接推测细胞坏死水平。结果　肺IR后 ,肺组织透射电镜观察可见肺泡Ⅱ型上皮细胞增多 ,并且不同程度出现形态学改变 ,细胞体积缩小变圆 ,细胞核呈多形性 ,核被膜外折或内陷 ,核固缩并边集在核膜下呈月牙状或腰带状 ,胞浆浓缩 ,胞浆内嗜锇性板层体减少、排空增多 ,细胞膜上微绒毛减少或消失 ,提示细胞凋亡发生 ,肺泡Ⅰ型上皮细胞则少有上述改变。单独缺血30min ,肺泡细胞凋亡指数无增高。肺再灌注后 0 5h起 ,肺泡细胞凋亡指数显著增高 ,再灌注 2h时达到高峰。与细胞凋亡指数相比 ,坏死指数与肺功能损害的相关性更显著。结论　肺IR后发生凋亡的主要是肺泡Ⅱ型上皮细胞。肺泡细胞凋亡指数于再灌注 2h达到高峰。肺泡细胞坏死指数与肺功能损害的相关性较凋亡指数更显著