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重组人截短型胰岛素样生长因子1在大肠杆菌中的高效表达
被引:2
作者:
李莹
邓鸿业
狄春辉
施群
韩文玲
马大龙
机构:
[1] 北京医科大学免疫系!北京
来源:
关键词:
人截短型胰岛素样生长因子-1;
大肠杆菌;
高效表达;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q786 [基因的表达];
学科分类号:
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要:
目的:建立人截短型胰岛素样生长因子1的原核高效表达系统。方法:利用基因重组技术将人截短型胰岛素样生长因子1〔Des(13)IGF1〕的cDNA片段克隆到融合蛋白表达载体pMTY4中,用离子交换层析法纯化蛋白并经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射免疫检测、N末端前16位氨基酸序列测定及生物活性检测等方法对所获蛋白进行了鉴定。结果:获得含人Des(13)IGF1基因的重组质粒,在大肠杆菌中高效表达出含凝血酶识别序列的MS2Des(13)IGF1融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化后纯化可获得与天然型一致的人Des(13)IGF1。结论:该方法是获得人重组Des(13)IGF1的有效途径,对进一步研究Des(13)IGF1有重要意义。
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