拟南芥质膜水通道蛋白RD28保守区段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备

实验利用ＰＣＲ 技术，从拟南芥质膜水通道蛋白ＲＤ２８ 的ｃＤＮＡ 中扩增了所有植物细胞质膜水通道蛋白的保守区段（４２０ ｂｐ） ，并将其构入ｐＧＥＸ ＫＧ。酶切、测序分析表明重组质粒ｐＧＥＸ ＲＤ２８ 结构正确。０１ ｍ ｍｏｌ／Ｌ 的ＩＰＴＧ 可诱导表达分子量约４０ ｋＤ 融合蛋白ＧＳＴ ＲＤ２８ ，该蛋白主要以非包涵体的形式存在。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ 亲和层析柱纯化得到了高纯度ＧＳＴ ＲＤ２８ ，并以纯化的融合蛋白为抗原制备拟南芥质膜水通道蛋白的抗体。