通腑泻肺颗粒调控MLCK-pMLC通路影响急性肺损伤小鼠肺屏障功能的研究

目的探讨通腑泻肺颗粒对急性肺损伤小鼠肺屏障功能的作用及可能机制。方法将SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、对照组、模型组、治疗组和激动组,每组25只。模型组、治疗组和激动组采用脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤模型;治疗组于注射LPS 30 min后灌胃通腑泻肺颗粒;激动组注射肌球蛋白轻链激酶(MLCK)激动剂P物质(SP) 15 min后注射LPS,30 min后灌胃通腑泻肺颗粒。造模16 h后,颈动脉放血处死小鼠,光学显微镜下观察各组小鼠肺组织病理切片;测定小鼠肺组织湿/干重比; Evans Blue法检测肺血管通透性; BCA法检测支气管肺泡灌洗液中总蛋白浓度,并计数肺泡灌洗液中白细胞总数; qRT-PCR法检测肺组织中带状闭合蛋白-1(ZO-1)、血管内皮细胞钙依赖性黏附素(VE-cadherin) mRNA表达水平,Western Blot法检测肺组织中ZO-1、VE-cadherin、MLCK、磷酸化肌球蛋白轻链(pMLC)蛋白表达水平。结果治疗组小鼠肺部炎症反应减轻,且肺血管通透性、肺组织湿/干重比、肺泡灌洗液中总蛋白水平及白细胞数量均显著低于模型组及激动组(P均<0. 05);治疗组小鼠肺组织中ZO-1、VE-cadherin mRNA及蛋白表达水平均明显高于模型组和激动组(P均<0. 05),MLCK、pMLC蛋白表达水平均明显低于模型组和激动组(P均<0. 05)。结论通腑泻肺颗粒可以显著改善LPS诱导的小鼠急性肺损伤的肺部屏障功能,机制可能为其可抑制MLCK-pMLC通路活性,维持肺血管内皮通透性,从而减轻肺部炎性渗出及肺水肿。