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转乙型肝炎病毒x基因肝癌细胞株的建立
被引：6
作者：
闵军
陈积圣
刘彦文
罗树红
余新炳
机构：
[1] 中山医科大学孙逸仙纪念医院肝胆外科
[2] 中山医科大学分子原虫实验室
来源：
关键词：
癌,肝细胞;
乙型肝炎病毒x基因;
逆转录病毒载体;
转基因细胞模型;
D O I：
暂无
中图分类号：
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号：
100214 ;
摘要：
目的 建立表达转乙型肝炎病毒x基因 (HBx)的人肝癌细胞株 ,为研究HBx基因与肝癌生物学行为间的关系提供模型。方法 以聚合酶链反应 (PCR)法从 3.2kb乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组中扩增HBx基因 ,亚克隆至逆转录病毒载体 ,磷酸钙共沉淀法将其导入包装细胞系 ,以含病毒的培养上清感染人肝癌细胞系QGY770 1 ,新霉素 (G41 8)筛选 ,PCR与反转录PCR (RT PCR)鉴定。结果 PCR法从HBV基因组扩增出 51 8bp片段 ,序列分析证实其中含HBx基因全编码序列 ;用逆转录病毒将HBx基因转导QGY770 1细胞系 ,G41 8筛选 4～ 6周后出现阳性克隆株QGY/HBx ,PCR法从其基因组中鉴定出全长HBx基因整合 ,RT PCR证实细胞有HBxmRNA的稳定表达。结论 建立了稳定表达HBx基因的肝癌细胞株QGY/HBx
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