1型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立

被引:5
作者
杨依霏 [1 ]
罗青平 [2 ]
张蓉蓉 [2 ]
艾地云 [2 ]
廖永洪 [2 ]
邵华斌 [2 ]
程国富 [1 ]
机构
[1] 华中农业大学动物医学院动物病理实验室
[2] 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词
鸭疫里氏杆菌; 重组ompA蛋白; ELISA;
D O I
10.16437/j.cnki.1007-5038.2012.01.018
中图分类号
S858.32 [鸭];
学科分类号
0906 ;
摘要
以1型鸭疫里氏杆菌(RA)全基因组保守区域ompA基因的重组表达产物为包被抗原,建立了检测RA血清抗体的间接ELISA方法。原核表达的重组ompA蛋白经纯化后作为包被物,以方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度为1.5μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100。与普通的微量凝集试验相比较,该方法灵敏度高于凝集试验约16倍~128倍。与鸭源大肠埃希菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭链球菌、鸭源呼肠病毒、鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒感染鸭血清均无交叉反应,表明该方法特异性好。利用该方法检测了雏鸭免疫RA灭活油乳剂疫苗之后血清抗体水平。
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