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用PCR法快速筛选中国对虾含微卫星的重组阳性克隆
被引:18
作者:
徐鹏
周岭华
相建海
机构:
[1] 中国科学院海洋研究所!山东青岛
来源:
关键词:
中国对虾;
微卫星;
聚合酶链式反应;
D O I:
暂无
中图分类号:
Q503 [生物化学技术];
学科分类号:
071010 ;
081704 ;
摘要:
运用PCR法在中国对虾的小片段基因组文库中快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆。PCR中使用的引物为载体pGEM - 3zf(+)上多克隆位点两侧的T7/Sp6启动子引物和根据微卫星核心重复序列设计的STR引物 :STR1:5’ -ATATATATATATAT - 3’ ;STR2 :5’ -TCTCTCTCTCTCTC - 3’。直接使用含有重组克隆的菌液 ,在PCR反应前增加一段裂解细菌的高温。筛选出来的含有微卫星序列的重组阳性克隆经DNA测序验证。结果证明 ,采用PCR方法用菌液快速筛选含有微卫星序列的重组阳性克隆完全可行 ,而且具有简便、快速、高效、不涉及同位素操作等优点
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