角膜干细胞增殖与分化表达实验研究

被引：29

作者：

潘志强

张文华

孙葆忱

机构：

[1] 北京市眼科研究所

来源：

中华眼科杂志 | 1999年 / 01期

关键词：

角膜缘,干细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R772.202 [];

学科分类号：

摘要：

目的了解角膜缘干细胞体外生长的增殖分化特性，检测上皮细胞生长因子对干细胞增殖的促进作用。方法采用ＤＭＥＭ和Ｆ１２培养基进行兔角膜上皮细胞培养，用克隆形成率（ｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＣＦＥ）、免疫组化染色和蛋白质免疫印迹等方法检测细胞的增殖力和分化表达状况。结果角膜缘干细胞（ｌｉｍｂａｌｓｔｅｍｃｅｌｓ，ＬＣ）在本培养条件下能够正常传代生长５代，ＣＦＥ为（５．０７±２．３５）％，而角膜中央上皮细胞（ｃｅｎｔｒａｌｃｏｒｎｅａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＣＣ）仅第１次传代生长，ＣＦＥ为（１．１２±０．８６）％；ＬＣ冻存后复苏率为（０．４３±０．２２）％，ＣＣ为（０．１６±０．０７）％，差异有非常显著性（ｔ＝－５．５４，Ｐ＜０．０１）；上皮细胞生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）在质量浓度为５ｎｇ／ｍｌ和２０ｎｇ／ｍｌ时对细胞的促增殖作用最强（ｔ＝－６．５１，Ｐ＜０．０１）。干细胞在培养初期，细胞角质蛋白Ｋ３染色阴性，第２、３代时逐渐表达；而蛋白质免疫印迹检测早期（原代，第２代）为阳性，晚期（第４代）为阴性。结论角膜缘干细胞在体外培养的初期更有利于进行干细胞移

引用

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