改良分子信标-实时PCR快速检测志贺菌

被引:20
作者
吴平芳 [1 ]
石晓路 [1 ]
郑琳琳 [2 ]
扈庆华 [1 ]
李庆阁 [2 ]
张佳峰 [2 ]
庄志雄 [1 ]
刘小立 [1 ]
张顺祥 [1 ]
王冰 [1 ]
贺连华 [1 ]
林一曼 [1 ]
机构
[1] 广东省深圳市疾病预防控制中心
[2] 厦门大学生命科学学院
关键词
志贺菌; 改良分子信标; 实时PCR; 检测;
D O I
暂无
中图分类号
R450 [];
学科分类号
100215 ;
摘要
目的:建立改良分子信标-实时PCR检测志贺菌的快速方法,应用于志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。方法:根据GenBank公布志贺菌ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于对志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果:改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为93 fgμ/l,菌液灵敏度为64 cfu/m l或2 cfu/PCR反应体系,无交叉反应。此反应体系检测67株志贺菌,均出现特异的荧光信号。对细菌性食物中毒样本等共657份样品进行志贺菌检测,42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌细菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需2 h1 d时间。结论:改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于志贺菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段,对于提高肠道门诊的工作效率有重要意义。
引用
收藏
页码:394 / 395+468 +468
页数:3
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共 2 条
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检验检疫科学, 2003, (05) :28-29