不同消化分离方法分离人羊膜间充质干细胞效果比较

被引：14

作者：

肖盼 ^{[1
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陈剑 ^{[1
]}

王彦平 ^{[2
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吴静 ^{[3
]}

郭娴吟 ^{[1
]}

杨筱曦 ^{[1
]}

刘小勇 ^{[1
]}

机构：

[1] 暨南大学附属第一医院眼科

[2] 暨南大学医学院病理生理学系

[3] 暨南大学医学院眼科研究室

来源：

中国病理生理杂志 | 2010年 / 26卷 / 05期

关键词：

羊膜; 间充质干细胞; 细胞分离;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329 [人体组织学];

学科分类号：

100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];

摘要：

目的:比较不同消化分离方法提取人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)的分离效果,以供选择一种更有效的分离方法。方法:将新鲜羊膜组织分成4片6cm×6cm大小的组织块,采用4种不同方法进行消化分离:第1组:先刮除+胶原酶Ⅱ组;第2组:先刮除+胶原酶Ⅳ组;第3组:先剪碎+胶原酶Ⅱ组;第4组:先剪碎+胶原酶Ⅳ组。对这4组原代培养HAMSCs进行存活数、形态学观察比较,第3代HAMSCs抗原检测及成脂成骨诱导分化实验。结果:第1组和第2组的HAMSCs存活数高于第3组和第4组(P<0.05)。第1组和第2组的HAMSCs成份较第3组和第4组纯净,后2组夹杂着一些团状的人羊膜上皮细胞(HAECs)。抗原结果显示CD29、CD44、CD73、CD90、CD105表达阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达阴性,Vimentin、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、telom-erase结果阳性。成脂成骨诱导分化实验成功。结论:通过先将人羊膜用胰蛋白酶+EDTA消化液消化后,再将HAECs刮除干净,然后剪碎再用胶原酶消化的改进方法对HAMSCs保护较好,较易提取,获取细胞量和纯度均较传统方法高。胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅳ2种消化酶对HAMSCs的提取影响不大。

引用

页码：1033 / 1037

页数：5

共 7 条

[1]

人羊膜间充质细胞具有分化成软骨及成骨细胞的潜能 [J].