蛋白质在疏水色谱法中的热行为

考察了一系列标准蛋白质在疏水色谱法中的热行为；研究了柱温变化对蛋白质和小分子保留值的影响。实验结果表明，每个蛋白质的保留值－温度曲线上都有一个固定的热变性转变温度。在这个温度以下，除热稳定性较高的溶菌酶外，蛋白质的保留值都随柱温的升高而线性地增加。在转变温度以上，保留值随柱温升高会迅速增大或减小。与蛋白质相反，小分子的保留值随柱温的升高会不断地减小。研究了柱温变化对酶活性的影响，并与酶的静态热失活进行了比较。发现仅在室温下疏水色谱法才具有温和的分离条件，在较高柱温下疏水固定相可以诱导蛋白质变性。柱温对蛋白质活性的影响取决于固定相疏水性的强弱。通常，在给定温度下疏水性越强，酶越容易失活。测定了不同柱温下α－淀粉酶在疏水色谱法中的Ｚ值（ｌｇｋ′对作图的斜率）。分析了较高柱温下导致蛋白质保留值的增长是由于蛋白质的构象变化。