高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸

建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸（kynu ren ine,Kyn）和色氨酸（tryp tophan,Trp）的高效液相色谱-紫外检测法。采用的色谱柱为Symm etry Sh ie ld RP-C18柱（150mm×3.9mm i.d.,5μm）,流动相为15mm o l/L乙酸钠-乙酸溶液（含2.7%乙腈,pH3.6）,流速为1.0m L/m in,紫外检测波长为225nm。血清标本经5.0%（体积分数）高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定。研究结果表明,Kyn保留时间为3.5m in,线性范围为0.098～49μm o l/L,最低检出浓度为0.02μm o l/L,回收率为90.82%93.45%;Trp保留时间为8.1m in,线性范围为4.9～490μm o l/L,最低检出浓度为0.20μm o l/L,回收率为95.51%98.67%。Kyn和Trp日内、日间测定的相对标准偏差均小于4%,苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰。该方法简便、快速、稳定、可行,可应用于临床和科研工作。