半套式PCR检测军团菌方法的建立及应用

被引：9

作者：

黄爱华

李君文

王新为

郑金来

不详

机构：

[1] 天津武警医学院军事医学教研室

[2] 军事医学科学院卫生学环境医学研究所

[3] 军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津

来源：

中国公共卫生 | 2002年 / 09期

基金：

天津市自然科学基金;

关键词：

军团菌; 半套式PCR; 16SrRNA; mip;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的　建立检测军团菌的分子生物学方法。方法　采用常规PCR对军团菌属 16SrRNA编码区域和嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强子 (mip)基因编码区域进行扩增 ,同时采用半套式PCR对常规PCR的扩增结果进行确证。结果　采用常规PCR对军团菌属 16SrRNA编码区域进行扩增 ,5种军团菌 (包括 3种嗜肺军团菌 )扩增产物均可见6 5 4bp的特异性扩增带 ,非军团菌菌株PCR结果为阴性 ,采用半套式PCR对常规PCR扩增产物进行验证 ,扩增产物均可见 4 30bp扩增带 ;同时采用常规PCR对嗜肺军团菌mip基因编码区域进行扩增 ,3种嗜肺军团菌扩增产物均可见6 4 9bp扩增带 ,非嗜肺军团菌菌株均为阴性 ,采用半套式PCR对常规PCR扩增产物进行验证 ,3种嗜肺军团菌扩增产物均可见 399bp扩增带。敏感性为 10CFU/ml。并且应用此方法成功检测环境水样中分离的疑似军团菌菌株。结论　半套式PCR经济、简便、快速、敏感、特异 ,为军团菌的早期检测、环境监测、控制暴发流行提供了有效手段

引用

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