熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的体外观察熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响,探讨熊果酸诱导肝星状细胞凋亡的可能作用机制。方法将不同浓度熊果酸作用于肝星状细胞 HSC-T6及肝细胞 L02,分别在药物作用24、48、72 h 后用四甲基偶氮唑盐法检测熊果酸对 HSC-T6及 L02细胞增殖的影响;流式细胞仪检测熊果酸对 HSC-T6凋亡的影响;光学显微镜观察熊果酸作用后细胞形态学变化情况;免疫细胞化学法检测 HSC-T6中 Bcl-2、Bax 和 Caspase-3蛋白的表达情况。结果各种浓度的熊果酸均可抑制 HSC-T6细胞的增殖,且呈剂量时间依赖性;当熊果酸浓度为25、50、75μmol/L 时可促进 L02细胞增殖,浓度>75μmol/L 则表现为抑制 L02细胞增殖。在病理形态学方面,熊果酸作用 HSC-T6细胞48 h 后,光学显微镜下可见细胞缩小变圆、核浓缩等。25、50、75 μmol/L 熊果酸作用 HSC-T6细胞48 h 后,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率分别为10.30%±3.85%、21.87%±4.46%、31.33%±6.18%,比对照组(2.93%±1.60%)明显升高(P<0.01)。免疫细胞化学显示Bax 及 Caspase-3蛋白表达较对照组升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,而 Bcl-2蛋白表达水平与对照组无明显差异(P>0.05)。结论在体外熊果酸可较明显地抑制 HSC-T6细胞增殖,诱导其凋亡;对 L02细胞的生长具有双向调节作用。熊果酸诱导 HSC-T6细胞凋亡可能与降低 Bcl-2/Bax 比值、激活 Caspase-3蛋白有关。