当归不同药用部位活性成分含量的HPLC分析方法及特征图谱研究

目的:建立同时测定当归不同药用部位中绿原酸、阿魏酸和Z-藁本内酯含量的HPLC分析方法及特征图谱,研究当归不同药用部位成分差异并加以区别。方法:含量测定,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（5μm,4.6 mm×250 mm）,以0.05%乙酸水溶液（A）-甲醇（B）为流动相,梯度洗脱（0～5 min,15%B→40%B;5～14 min,40%B;14～25 min,40%B→65%B;25～35min,65%B;35～40 min,65%B→90%B;40～45 min,90%B→100%B;45～57 min,100%B）,流速0.6 mL·min-1,采用变波长检测模式（0～30 min,326 nm;30～57 min,350 nm）,柱温35℃;特征图谱色谱的建立,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（5μm,4.6mm×250 mm）,以0.05%乙酸水溶液（A）-甲醇（B）为流动相,梯度洗脱（0～5 min,15%B→35%B;5～30 min,35%B→65%B;30～45 min,65%B;45～58 min,65%B→90%B;58～63 min,90%B→100%B;63～75 min,100%B）,流速0.6 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25℃。结果:不同产地不同批次当归不同药用部位中绿原酸的含量为0.020%0.079%,阿魏酸含量为0.025%0.134%,Z-藁本内酯含量为0.273%1.46%,有较大差异。特征图谱共确定21个特征峰,对样品特征图谱进行聚类分析、偏最小二乘法分析和主成分分析,样品分为3类。结论:所建立的含量测定方法简单、快速、灵敏、准确,能够用于当归不同药用部位中活性成分的含量测定。所建立的特征图谱方法能较好地反映当归药材的整体情况。两者结合可以更好地对当归药材的质量进行综合评价。当归不同药用部位化合物成分有明显差异,本文研究结果为当归分部位用药提供了一定的理论依据。