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siRNA介导的hPOT1基因表达抑制对HeLa细胞凋亡的影响
被引：3
作者：
黄迪南
姜英华
梁爱玲
机构：
[1] 广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江,广东湛江,广东湛江
来源：
基金：
广东省自然科学基金;
关键词：
RNA干扰;
基因,hPOT1;
凋亡;
D O I：
暂无
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
1001 ;
摘要：
目的 应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,特异地抑制端粒保护蛋白hPOT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞凋亡的影响。方法利用先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsRNA)的3种重组siRNA表达质粒,由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT PCR和电泳迁移率变化分析法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过流式细胞术、Hoechst荧光染色和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果 不同hPOT1特异性序列的3种的重组质粒转染HeLa细胞4 8h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平降低,细胞凋亡水平明显增加。结论 siRNA表达载体介导的RNAi能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达下调导致HeLa细胞凋亡
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