牛病毒性腹泻病毒长春分离株P125基因的克隆与序列测定

被引:5
作者
骆延波
张绍学
王新平
宣华
牛钟相
柴家前
王承宇
机构
[1] 山东农业大学动物科技学院!山东泰安
[2] 解放军军需大学动物医学系!吉林长春
[3] 解放军军需大学
关键词
牛病毒性腹泻病毒; 基因克隆; 序列测定;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2001.02.001
中图分类号
S858.23 [牛];
学科分类号
摘要
以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)NCD毒株 ,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,并根据BVDVNADL参考株序列设计合成的 1对引物 (W 1与W 2 ) ,进行反转录PCR (RT PCR) ,扩增出P12 5基因区约40 0bp的片段。经 pGEM T载体连接后克隆、测序 ,并与已发表的NADL、Osloss、SD 1、184、D、H、Yak等BVDV毒株序列进行比较。结果表明 :NCD株P12 5基因区无插入或缺失变异 ,但存在着核苷酸的替换 ;经聚类分析初步认为NCD株属于Ⅰa型。NCD株与长春 184、H株核苷酸序列差异较大 ,而亲缘关系较近 ,表明BVDV在同一地区存在不同进化来源的毒株
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