结肠癌细胞系SW480肿瘤干细胞相关亚群初步分离、鉴定

背景与目的:肿瘤干细胞学说的提出为认识肿瘤提供了新的思路,越来越多种肿瘤的干细胞得到了分离鉴定;本实验旨在检测结直肠癌细胞系SW480中侧群细胞(side population, SP)亚群,通过无血清培养基初步分离SW480肿瘤干细胞相关亚群。方法:采用流式细胞术检测结直肠癌细胞系SW480中的SP细胞含量,添加表皮生长因子20μg/L、碱性成纤维生长因子10μg/L的无血清培养基(SFM)培养SW480,初步分离,富集肿瘤干细胞样亚群,有限稀释实验,诱导分化,传代更新,含血清/无血清培养基交替培养证实肿瘤干细胞相关亚群。结果:SW480细胞系中SP细胞含量为1.2%;SW480细胞中0.54%～0.62%的细胞能在无血清培养基中存活、增殖并形成悬浮肿瘤细胞球;在SFM中加入血清可促使肿瘤干细胞相关细胞分化;肿瘤干细胞相关细胞可以连续传代,并可交替培养于含10%小牛血清培养基(SSM)和SFM中。结论:结直肠癌细胞系SW480中含SP细胞,SW480中的肿瘤干细胞相关亚群可通过无血清培养基初步富集。