新城疫单抗ELISA试剂盒的研制及其初步应用

被引:26
作者
吴红专,张如宽,刘秀梵
机构
[1] 江苏农学院,华南农业大学
关键词
新城疫病毒,单克隆抗体,试剂盒,快速诊断;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.1995.06.001
中图分类号
S858.310.5 [];
学科分类号
0906 ;
摘要
在单抗夹心ELISA和单抗PEG—ELISA的基础上首次建立了快速诊断新城疫(ND)的单抗ELISA试剂盒。以0.5~2μg/ml的M22单抗包板,在选择的最佳工作条件下,对提纯的新城疾病毒(NDV)的最小检出量为2.5~5ng/ml病毒蛋白;NDV阳性血清对本试剂盒有特异性阻断作用,与鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡痘病毒(FPV)、减蛋综合征病毒(EDS—76)、鸡马立克氏病病毒(MDV)、大肠杆菌(E.coli)、沙门氏菌(Salmonella)交叉反应的阴性结果及双盲考核试验的结果均表明它对NDV具有特异性;试剂盒批内与批间重复试验变异系数小于6%;酶标抗体冻干前后活性未发生变化,以20%的脱脂乳为冻干保护剂冻干后工作浓度与物理性状最佳;包被单抗后的酶标板经吸干、密封后,在4℃可保存6个月,-20℃保存一年以上稳定性未发生变化;冻干后的酶标抗体在4℃可保存300天以上,0℃以下1年活性未见下降;试剂盒在4℃可保存6个月,0℃以下保存1年。用该试剂盒检测从疑有NDV强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉林样品3024份,共检出阳性1240份;从临床有典型ND病变的鸡群中采集样
引用
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共 3 条
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