人恶性胶质瘤干细胞的分离与鉴定

被引:7
作者
李光辉 [1 ]
王东林 [2 ]
陈正堂 [1 ]
尹昌林 [3 ]
纪华 [1 ]
吕胜青 [3 ]
机构
[1] 第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所
[2] 同济大学附属同济医院肿瘤科
[3] 第三军医大学新桥医院神经外科
关键词
神经胶质瘤; 肿瘤干细胞; 细胞分离;
D O I
10.16073/j.cnki.cjcpt.2007.13.004
中图分类号
R739.4 [神经系肿瘤];
学科分类号
摘要
目的:从人恶性胶质瘤中分离并鉴定胶质瘤干细胞。方法:采用神经干细胞无血清培养方法,分离胶质瘤干细胞,免疫细胞化学法、有限梯度稀释实验、二代球体形成分析、流式细胞分析等方法对胶质瘤干细胞进行鉴定。结果:3例患者原代培养胶质瘤细胞中CD133+细胞分别为7.4%、2.8%和4.2%。每100个原代胶质瘤细胞中可形成1个左右的胶质瘤细胞球;胶质瘤细胞球细胞均表达神经干细胞标记CD133和Nestin,不表达分化标志GFAP和MAP2,少数细胞表达分化标记MBP。每100个原代胶质瘤细胞球体细胞可形成6.07±2.15个悬浮生长的二代胶质瘤细胞球,二代细胞球细胞表达CD133和Nestin。胶质瘤细胞球细胞分化后细胞多数表达GFAP,少数表达MAP2和MBP。胶质瘤球体干细胞的增殖较原代胶质瘤细胞慢。胶质瘤球体细胞1×103个时可成瘤,原代培养的胶质瘤细胞需1×107。结论:采用神经干细胞培养条件可以很简便的分离出悬浮生长的胶质瘤球体干细胞。分离出的胶质瘤球体干细胞表达CD133抗原,具备肿瘤干细胞的基本特征。
引用
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