丝状蓝藻与大肠杆菌之间杂合质粒的构建与克隆

被引:3
作者
孙立春,楼士林
机构
关键词
plectonemaboryanum,pUC13-pPb1,转化;
D O I
暂无
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
丝状蓝藻plectonemaboryanum的pPb1经HpaⅡ酶酶切与AccⅠ酶酶切的pUC13构成杂合质粒,杂合质粒克隆到E.coliJM109、频率为3.4%.转化进E.ColiJM109的杂合质粒,用EcoRⅠ和HpaⅠ酶切后得到证实.杂合质粒转化到新制备的P.boryanum原生质球或丝状体后,再生的藻体表现出高于原来两倍以上的Ap抗性.利用Ap敏感的E.coli平板培养,证实了转化入藻体的质粒对Ap具有高抗性.然而,获得的Ap高抗株在后续培养中不能继代维持.
引用
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