不同破壁方法提取真菌DNA的比较

被引：15

作者：

周万青 ^{[1
,2
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李芳秋 ^{[2
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王立魁 ^{[2
]}

邵海枫 ^{[2
]}

史利宁 ^{[2
]}

机构：

[1] 江苏大学基础医学与医学技术学院

[2] 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所中心实验科

来源：

临床检验杂志 | 2009年 / 27卷 / 03期

关键词：

真菌; DNA; 提取; PCR;

D O I：

10.13602/j.cnki.jcls.2009.03.016

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

摘要：

目的探索和评价提取致病性真菌DNA的简便方法。方法分别用6种方法(液氮冻融、-70℃冻融、溶胞酶消解、超声破碎、高盐溶液、尿素溶液)裂解真菌细胞壁,再用市售DNeasy B lood&Tissue K it试剂盒提取DNA,最后通过对提取物进行比色定量和PCR检测评价各种提取方法的优弊。结果酶消解破壁法提取真菌DNA效率最高,重复性良好。模拟全血标本中白色念珠菌检测限为102个孢子,烟曲霉及新型隐球菌检测限为103个孢子。结论酶消解破壁法提取真菌DNA在6种方法中效率最高,可用于临床常见真菌感染的PCR快速诊断。

引用

页码：212 / 214

页数：3

共 3 条

[1] A New Approach to the Isolation of Genomic DNA from Yeast and Fungi: Preparation of DNA-containing Cell Envelopes and Their Use in PCR[J] . V. N. Danilevich,E. V. Grishin.Russian Journal of Bioorganic Chemistry . 2002 (2)
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Haugland, RA
Heckman, JL
Wymer, LJ
[J]. JOURNAL OF MICROBIOLOGICAL METHODS, 1999, 37 (02) : 165 - 176
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