抗人肝癌单克隆抗体HAb18 Fab基因的克隆和表达

被引:6
作者
邢金良
王永庆
杨向民
宋斐
陈志南
机构
[1] 第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学细胞工程研究中心,第四军医大学细胞工程研究中心陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安,陕西西安
关键词
肝癌; 单克隆抗体; Fab; 表达;
D O I
暂无
中图分类号
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号
100112 [医学生物化学与分子生物学];
摘要
目的:克隆抗人肝癌单抗(mAb)HAb18的Fab基因,并在大肠杆菌中表达。方法:采用RT-PCR法,利用设计的引物扩增mAb Fd和K链全长基因,并分别克隆到T载体中进行序列分析。然后,亚克隆到原核表达载体pComb3中,转化感受态大肠杆菌后以IPTG诱导表达。采用ELISA和免疫荧光法检测表达产物的特异性。结果:克隆了mAb HAb18的Fah基因,并在大肠杆菌中获得表达。竞争性ELISA和免疫荧光检测证实,表达产物具有与相应抗原特异结合的活性。结论: 成功地构建了抗人肝癌小分子Fab抗体,为其进一步在肝癌诊断与治疗中的应用奠定了基础。
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页码:570 / 573
页数:4
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