PCR温度特性实验研究与分析

被引：5

作者：

程远霞 ^{[1
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魏燕 ^{[2
]}

鲁祥友 ^{[2
]}

刘宝林 ^{[2
]}

华泽钊 ^{[2
]}

机构：

[1] 淮海工学院

[2] 上海理工大学

来源：

生命科学仪器 | 2008年 / 06期

关键词：

聚合酶链式反应; 温度准确性; 温度均一性; 温度重复性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q503 [生物化学技术];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

目的:测量PCR温度的准确性和均一性。方法:PCR主程序:变性95℃,30 s,退火55℃,40 s,延伸72℃,50s,6个循环;热电偶分别放在孔内和管内。结果:每个循环以及每次测量的孔和管内的温度重复性很好;变性阶段,孔的温度和管内液体温度与程序温度偏差较大,温度准确性都较差,但所有孔的温度都达到通常需要的变性温度(变性90℃以上),但是44.4%的孔在90℃以上停留的时间不能达到设置的时间;变性阶段,11.1%管内液体不能达到所需的变性温度(90℃)。结论:这些缺陷可能导致扩增结果假阳性或假阴性。

引用

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