脓毒症单核巨噬细胞特异性结合肽的筛选

被引：8

作者：

丁宁

刘承武

李志杰

刘靖华

邓鹏

姜勇

机构：

[1] 南方医科大学病理生理学教研室和广东省功能蛋白质组学重点实验室

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2007年 / 12期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

单核/巨噬细胞; 脂多糖; 噬菌体展示; 肽库; 脓毒症;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2007.12.017

中图分类号：

R459.7 [急症、急救处理];

学科分类号：

100231 [临床病理学];

摘要：

利用噬菌体随机肽库展示技术,筛选出与脓毒症单核/巨噬细胞特异性结合的短肽,探索脓毒症治疗的新方法.分别以经过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理的人外周血单核细胞株(THP-1)细胞作为筛选的靶细胞,以未经LPS处理的THP-1细胞作为非特异性噬菌体吸附细胞,对噬菌体随机环七肽库进行4轮"差减"筛选,经过细胞ELISA验证阳性噬菌体克隆,对获得的阳性克隆进行DNA测序及生物信息学分析,并进一步利用免疫荧光实验,鉴定噬菌体克隆与LPS处理THP-1细胞的结合特异性.4轮筛选后,随机挑取的噬菌体克隆,测序后得到可与LPS处理的THP-1细胞特异性结合肽.对去冗余后的七肽进行Clustal W多序列比对分析和BlastP蛋白同源相似性分析,细胞免疫荧光检测确定获得的噬菌体展示七肽可与LPS处理的THP-1细胞特异性结合.噬菌体随机肽库技术为脓毒症单核/巨噬细胞表面靶位的筛选提供了高效、快捷的筛选体系,实验获得的多肽基序具有高度保守性和细胞特异性,这些多肽的生物活性将是下一步的研究内容.

引用

页码：1045 / 1050

页数：6

共 3 条

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.[J]...,

[2]

Phage display for target-based antibacterial drug discovery [J].

Christensen, DJ ;

Gottlin, EB ;

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[3]

从全身炎症反应综合征到脓毒性休克.[J].郭爱华.中国危重病急救医学.2002, 08

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