大鼠胚胎上胚层干细胞的分离培养研究

被引：1

作者：

邓新燕 ^{[1
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杨景超 ^{[1
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陆杰 ^{[1
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聂恩琼 ^{[1
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张应涛 ^{[1
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郭中敏 ^{[1
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机构：

[1] 中山大学实验动物中心

[2] 中山大学公共卫生学院

来源：

热带医学杂志 | 2015年 / 15卷 / 05期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

上胚层; 多分化潜能; 上胚层干细胞; 活化素;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q813.11 [];

学科分类号：

摘要：

目的获取SD大鼠胚胎中附植后的胚胎上胚层干细胞(Epi SCs),并就影响SD大鼠Epi SCs(SDEpi SCs)分离与培养的组织来源、胎龄、细胞因子等条件进行探讨,从而探索适宜SD大鼠Epi SCs分离培养的实验体系,为下一步SD大鼠Epi SCs的建系提供实验研究基础。方法以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,分别取5.5日胎龄的囊胚和7.5日胎龄囊胚上胚层(Epiblast),用添加白血病抑制因子(LIF)或活化素(activin)的基础培养基进行原代培养,分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代培养。最后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并检测其体外分化能力。结果培养于LIF培养基和activin培养基中的囊胚均发生严重分化。培养于LIF培养基中的Epiblast也发生了严重的自发分化,而在activin培养基中,Epiblast形成SDEpi SCs原代集落。经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SDEpi SCs。结论利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.5日胎龄SD大鼠胚胎中获得SDEpi SCs。

引用

页码：606 / 609+718 +718

页数：5

共 6 条

[1]

A Novel Nodal Enhancer Dependent on Pluripotency Factors and Smad2/3 Signaling Conditions a Regulatory Switch During Epiblast Maturation [J].