布氏杆菌PCR检测方法的建立

被引：23

作者：

王胜昌

邵伟娟

谢建云

高诚

机构：

[1] 上海市实验动物质量监督检验站

[2] 上海市实验动物质量监督检验站上海

[3] 上海

来源：

上海实验动物科学 | 2003年 / 03期

关键词：

布氏杆菌R型(粗糙型)抗原; 布氏杆菌S型(光滑型)抗原; PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

根据编码31-kDa布氏杆菌蛋白的基因(BSCP31),设计两对引物。对布氏杆菌R型(粗糙型)抗原及S型(光滑型)抗原、大肠杆菌、溶血性链球菌、嗜肺巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、螺旋杆菌、绿脓杆菌分别采用两种提取、纯化DNA的方法,并以纯化的各细菌DNA为模板,分别进行内、外引物PCR反应及套式PCR反应,反应时以灭菌超纯水作为空白对照。结果显示:进行内、外引物PCR反应和套式PCR反应时,布氏杆菌R型及S型均出现预期的扩增带594bp、460bp及460bp,且套式扩增后条带亮度明显增强,而作为验证PCR特异性或对照的大肠杆菌、溶血性链球菌、嗜肺巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、螺旋杆菌、绿脓杆菌、灭菌超纯水均无扩增带。验证敏感性时用外引物对布氏杆菌R型、S型DNA进行扩增后,最低可检测到1pg的布氏杆菌DNA。

引用

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页数：4