枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达

被引：12

作者：

徐娴

谢承佳

何冰芳

机构：

[1] 南京工业大学制药与生命科学学院

来源：

食品与生物技术学报 | 2007年 / 05期

关键词：

葡萄糖脱氢酶; 葡萄糖脱氢酶基因; 高效表达; 辅酶再生;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。

引用

页码：75 / 78

页数：4

共 10 条

[1] 单菌落PCR法直接快速鉴定重组克隆 [J].

陈书霞 ;

王晓武 ;

房玉林 .

微生物学通报, 2006, (03) :52-56

[2] 迅速发展中的不对称生物催化技术 [J].

许建和 ;

杨立荣 ;

孙志浩 ;

徐岩 .

生物加工过程, 2005, (03) :1-6

[3] 带自身启动子的bgaB基因在枯草芽孢杆菌中的表达 [J].

傅晓燕 ;

陈卫 ;

夏雨 ;

张灏 .

食品与生物技术学报, 2005, (03) :44-47+51

[4] 辅酶再生体系的研究进展 [J].

张翀 ;

邢新会 .

生物工程学报, 2004, (06) :811-816

[5] Co-expression of P450BM3 and glucose dehydrogenase by recombinant Escherichia coli and its application in an NADPH-dependent indigo production system [J].

Lu, Yan ;

Mei, Lehe .

JOURNAL OF INDUSTRIAL MICROBIOLOGY & BIOTECHNOLOGY, 2007, 34 (03) :247-253

[6] High-level expression of recombinant glucose dehydrogenase and its application in NADPH regeneration [J].

Xu, Zhinan ;

Jing, Keju ;

Liu, Ying ;

Cen, Peilin .

JOURNAL OF INDUSTRIAL MICROBIOLOGY & BIOTECHNOLOGY, 2007, 34 (01) :83-90

[7]

Asymmetric reduction of ethyl 4-chloro-3-oxobutanoate to ethyl （R）-4-chloro-3-hydroxybutanoate with two co-existing, recombinant Escherichia coli strains[J] . Ying Liu,Zhinan Xu,Keju Jing,Xiaoxia Jiang,Jianping Lin,Fang Wang,Peilin Cen.Biotechnology Letters . 2005 (2)

[8] Recent developments in pyridine nucleotide regeneration [J].

van der Donk, WA ;

Zhao, HM .

CURRENT OPINION IN BIOTECHNOLOGY, 2003, 14 (04) :421-426

[9]

Novel bioreduction system for the production of chiral alcohols[J] . M. Kataoka,K. Kita,M. Wada,Y. Yasohara,J. Hasegawa,S. Shimizu.Applied Microbiology and Biotechnology . 2003 (5)

[10]

Sambrook,J,Fritsch,EF,Maniatis,T. Molecular Cloning: A laboratory Manual . 1989

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