脂多糖保守表位模拟肽的筛选与鉴定

用针对脂多糖保守表位的单抗 2B4对噬菌体随机 12肽库进行亲和筛选 ,通过噬菌体ELISA实验及脂多糖(LPS)竞争抑制实验鉴定阳性克隆 .经三轮筛选后 ,与抗体结合的噬菌体得到明显富集 ,噬菌体ELISA结果显示 ,阳性率达 80 % .将其中 12个阳性噬菌体克隆做鼠伤寒杆菌和大肠杆菌LPS竞争抑制实验 ,抑制作用非常明显 ,有良好的剂量依赖关系 ,证明这 12个克隆与LPS具相似表位 .DNA测序并推导噬菌体展示肽的氨基酸序列为 ,GPPQWFFSQPQL (5 / 12 ,41 7% ) ,LPQYFWNTATTA (3/ 12 ,2 5 % ) ,FPQNHWNVPWAT (2 / 12 ,16 6 % ) ,HSQSFWNAPLAM和AHPWTHGYFPPL (1/ 12 ,8 3 % ) .实验结果表明 ,用 2B4抗体筛选到的噬菌体短肽克隆可模拟保守表位 ,即脂多糖的模拟肽 (位 ) .