丙戊酸钠通过p21调控大鼠神经干细胞的增殖

目的探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对体外培养的成年雌大鼠脊髓神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。方法采用不同浓度的VPA(10-5、10-4、10-3、10-2、10-1、1、10 mmol/L)作用于NSCs,CCK-8法检测在不同时间点(0、24、48、72 h)对细胞增殖的影响;VPA(10-5、1 mmol/L)作用于NSCs 48 h后,流式细胞仪测定细胞周期分布,PCR测定p21在基因水平的表达,Western blot测定p21在蛋白质水平的表达。结果 CCK-8检测显示,当VPA浓度>10-5mmol/L时,体外培养的成年大鼠脊髓NSCs的增殖受到明显抑制,且具有时间依赖性。流式细胞仪细胞周期检测显示,同样浓度下,VPA可阻滞NSCs由G0/G1期向S期转换,表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞减少。PCR检测发现VPA可促进p21基因水平的表达。Western blot检测发现VPA可促进p21蛋白质水平的表达,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 VPA可能通过促进p21表达,使NSCs阻滞于G0/G1期,最终抑制NSCs增殖。