数字RT-PCR检测鲤春病毒血症的方法建立与应用

被引：12

作者：

吴斌 ^{[1
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申翠翠 ^{[1
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张晨曦 ^{[2
]}

胡德聪 ^{[3
]}

肇慧君 ^{[1
]}

张琳 ^{[1
]}

机构：

[1] 辽宁出入境检验检疫局

[2] 大连大学

[3] 湖北出入境检验检疫局

来源：

中国动物检疫 | 2015年 / 32卷 / 07期

关键词：

鲤春病毒血症(SVC); 数字RT-PCR; 实时定量RT-PCR; 灵敏性; 特异性; 重现性;

D O I：

暂无

中图分类号：

S943 [各种鱼的病害、敌害及其防治];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

[目的]通过实时定量RT-PCR和数字RT-PCR两种方法的比对试验,建立快速检测鲤春病毒血症的数字RT-PCR方法。[方法]利用同一对引物和探针,以梯度稀释的方法测定两种方法针对SVCV的灵敏性、特异性及重现性。[结果]两种方法均能够检测出104倍稀释的SVCV,而数字RT-PCR可以检测出单个微滴中的SVCV,其灵敏度性高于实时定量RT-PCR。同时,两种方法的特异性都很强,对其他病毒,如传染性胰腺坏死病毒(IPNV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血败血病毒(VHSV)均未有扩增反应。两种方法的重现性也较好。[结论]数字RT-PCR方法比实时定量RT-PCR具有更高的灵敏度,在鲤春病毒血症的早期快速诊断方面具有重要作用。

引用

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