伤寒杆菌耐喹诺酮类机制分子生物学基础研究

被引:20
作者
肖永红
王其南
机构
[1] 重庆医科大学附属第一医院,重庆医科大学附属第一医院
关键词
沙门菌,伤寒; 旋转酶A; 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性、单链构象多态性分析; 脱氧核糖核酸序列;
D O I
暂无
中图分类号
R378.23 [];
学科分类号
摘要
目的 研究伤寒杆菌DNA旋转酶A亚单位基因 (gyrA)变异与其耐喹诺酮类的关系。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)检测、限制性片段长度多态性 (RFLP)、单链构象多态性分析 (SSCP)及序列测定 ,对伤寒杆菌S2 75 (临床分离敏感菌株 )及其自发耐药突变株RG1,DNAgyrA喹诺酮类耐药决定区进行了研究。结果 伤寒杆菌S2 75 gyrA第 12 8~ 42 6位碱基与大肠杆菌KL 16高度同源 ,仅 7.49%有差异 ,且大部分为静变异 ,最终仅使DNA旋转酶A亚单位产生Thr 45→His、Arg 49→Leu及Val 5 6→Gly ,均位于喹诺酮耐药决定区 (第 6 7~ 10 6位氨基酸 )外。RG1仅有第 2 47位碱基T→G变异 ,相应Ser 83→Ala ,使萘啶酸、氧氟沙星及环丙沙星对伤寒杆菌的MIC由 2、0 .0 6、<0 .0 3mg/L上升为 5 12、2、1mg/L。Ala替换与文献报道沙门杆菌该位以苯丙氨酸、酪氨酸替换为主不同。PCR RFLP及SSCP分析结果与上述情况类似。结论 gryA第 83位变异为其耐药主要原因
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