咖啡因、顺铂诱导骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究咖啡因、顺铂诱导骨肉瘤细胞株(OS-732)细胞凋亡的作用,探讨咖啡因在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的机制。方法骨肉瘤细胞株(OS-732)经单纯细胞培养、与咖啡因、顺铂、咖啡因和顺铂联合作用各72h后,分别采用流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡比例,通过细胞内Rh123荧光强度的测定分析线粒体跨膜电位△ψm的变化,并应用电子显微镜观察细胞凋亡的形态变化。结果骨肉瘤细胞株(OS-732)分别经单纯培养72h、与5.0mmol/L的咖啡因作用72h、与10.0μg/ml的顺铂作用72h、与咖啡因(5.0mmol/L)和顺铂(10.0μg/ml)共同作用72h后,FCM分析显示细胞凋亡比例分别为2.50%、10.62%、31.62%、57.44%;后三者导致线粒体跨膜电位△ψm明显下降,分别为26.45%、17.82%、38.26%。透射电镜观察显示典型的细胞凋亡特征性变化:细胞皱缩,胞膜结构保持完整,胞浆空泡化明显,胞核固缩,染色质浓缩并边缘化,表现为新月形胞核。结论咖啡因、顺铂均可诱导骨肉瘤细胞凋亡,咖啡因和顺铂联合使用,可使诱导细胞凋亡的作用明显增强。咖啡因诱导骨肉瘤细胞凋亡可能是咖啡因在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的潜在机制之一。