Real-Time PCR溶解曲线及Myostatin基因在肉类掺假快速鉴别中的应用

肉类掺假不仅损害消费者利益,而且易引发民族矛盾,甚至会让过敏人群产生严重的过敏反应,因此对市场上销售的肉的种类进行快速、有效的鉴别意义重大。利用SYBRGreen实时PCR的方法,采用对家禽和哺乳动物Myostatin基因都有特异性扩增的通用引物MY,以确保所提取肉类DNA的质量。利用SYBRGreen实时PCR的溶解曲线对肉类成分进行检测判断。结果表明,在SYBRGreen实时PCR系统中,MY通用引物能够对市场上常见肉的DNA(猪、牛、山羊、绵羊、鸡、鸭)进行扩增。在利用猪肉冒充羊肉的检测中,能够利用两对引物的平均溶解温度的不同[猪Tm=(82.03±0.25)℃;羊Tm=(78.83±0.16)℃]对猪、羊肉进行鉴别,能够从1%猪肉+99%羊肉的混合物中检测出1%猪肉(0.1ng),从0.1%羊肉+99.9%猪肉的混合物中检测出0.1%(0.01ng)羊肉。