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BMP-2,BGP mRNA表达量及ALP活性的变化对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导成骨细胞的影响
被引：31
作者：
娄鸣
[1
]
李晓红
[1
]
饶国洲
[2
]
机构：
[1] 西安交通大学口腔医院修复科
[2] 西安交通大学口腔医院中心实验室
来源：
关键词：
骨髓间充质干细胞;
细胞培养;
体外;
成骨细胞;
碱性磷酸酶;
骨形成蛋白-2;
骨钙素;
实时聚合酶链反应;
D O I：
暂无
中图分类号：
R329 [人体组织学];
学科分类号：
100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];
摘要：
目的建立骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养体系,探讨BMSCs诱导条件下骨向分化能力和骨形成蛋白-2(BMP-2)、骨钙素(BGP)mRNA表达量及ALP活性的变化对成骨细胞增殖分化的影响。方法采用密度梯度离心法和贴壁培养法分离大鼠BMSCs,观察细胞形态学特征;应用成骨诱导体系诱导BMSCs向成骨细胞进行分化;通过细胞形态学观察、组织化学染色鉴定,酶联免疫分析仪和RT-PCR分别定量检测7 d和14 d ALP活性及BMP-2,BGP mRNA表达。结果用密度梯度离心法结合贴壁培养法能获得高纯度的BMSCs;经骨向诱导7 d和14 d后,ALP和矿化结节染色阳性;骨向诱导组:14 d ALP活性82±1.0 U/L,mRNA表达BMP-2为6.04±0.02,BGP为3.21±0.02,分别较7 d(33±2.0 U/L,1.40±0.01,1.1±0.01)显著增高(P<0.01)。未诱导组:ALP活性低(12±1.0 U/L),BMP-2,BGP mRNA未表达,无矿化结节形成。结果显示:随培养时间延长,BMP-2增高的同时ALP活性及BGP表达量也明显增高,细胞形态发生改变并向成骨方向分化,表明与形成成骨细胞有关。结论将BMSCs成功诱导分化为成骨细胞,并建立了体外分离培养体系。提示BMP-2,BGP mRNA表达量的增加及ALP活性增高,与细胞骨向分化具有较高的相关性。
引用
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