空瓶刺激心理应激法建立大鼠血管内皮损伤模型的评价

目的评价空瓶刺激心理应激法建立的大鼠血管内皮损伤模型,为心理应激与血管内皮细胞(VEC)损伤关系的研究提供实验工具。方法将16只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组各8只,两组第1周每天早晚9点定时喂水10 min;第8～21天,对照组(群居饲养)早晚9点依然定时饮水10 min,模型组(孤独饲养)早晚9点按随机表给予空瓶刺激或喂水10 min,两组均按体质量腹腔注射生理盐水(200 g/mL)2次/d。用旷场实验观察大鼠行为学变化;放射免疫法检测血浆皮质醇(COR),ELISA法检测血浆肾上腺素(Adr),硝酸还原酶法检测血浆一氧化氮(NO),放射免疫计数法检测血浆内皮素(ET)、6-酮-前列环素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2),化学比色法检测血浆Adr代谢产物H2O2,高效液相色谱法检测血浆甲胺(MA)及甲醛(FA);采用透射电镜观察VEC超微结构。结果与对照组比较,模型组大鼠行为学垂直得分、水平得分及总分均增高(P均<0.05),血浆COR、Adr、ET、TXB2、H2O2、MA、FA水平升高(P均<0.05),NO、6-Keto-PGF1α水平降低(P均<0.05),NO/ET、6-Keto-PGF1α/TXB2值均下降(P均<0.05)。透射电镜显示,模型组VEC的线粒体嵴模糊,部分线粒体出现空泡;对照组VEC线粒体结构完整,嵴清晰、排列紧密。结论空瓶刺激心理应激能够造成VEC功能和结构的损伤,此造模方法可用于心理应激、VEC损伤与保护的相关研究。