抗李斯特氏菌溶血素单克隆抗体制备及检测LMO的初步应用

被引:4
作者
秦玉敏 [1 ]
李一经 [1 ]
赵林立 [2 ]
张赟硕 [1 ]
乔薪瑗 [1 ]
齐炳理 [1 ]
机构
[1] 东北农业大学动物医学院
[2] 内蒙古出入境检验检疫局
关键词
李氏溶血素; 单克隆抗体; ELISA;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的制备抗李氏溶血素单克隆(LLO)抗体,初步应用单克隆抗体检测LMO。方法以重组LLO为免疫原,以天然LLO为筛选蛋白,通过淋巴细胞杂交瘤技术,制备抗LLO单克隆抗体;以ELISA、Westernblot等方法对单克隆抗体进行鉴定;以阻断ELISA法进行检测LMO的探索。结果获得了1株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C4,经鉴定此单抗为IgG1型,属κ链抗体,杂交瘤细胞染色体数目在85~103。ELISA和Westernblot实验表明此单抗对LLO有较好的结合能力,对其他菌分泌的溶血素则无特异结合能力,用阻断ELISA检测LMO的检测时间和最低检测菌数分别为增菌后5h和9.5×105个/mL。结论研制了一株稳定分泌抗LLO单克隆抗体的杂交瘤细胞系,初步建立了阻断ELISA检测LMO的方法。
引用
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