獐牙菜总苷高效液相色谱指纹图谱研究

目的　研究獐牙菜总苷的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其工艺和质量提供可靠方法。方法　利用HPLC DAD方法,梯度洗脱,测定了10批獐牙菜总苷样品。色谱条件为:KromusilC18分析柱(250mm×4.6mmID, 5μm);柱温40℃;流动相A为10%甲醇水,流动相B为80%甲醇水,流动相A梯度洗脱( 100%→0% ),分析时间32min, 0-15minA∶B从100%∶0→0∶100%, 15-32min保持在0% A;流速为1. 0mL·min-1;检测波长为260nm。结果　10批獐牙菜总苷样品得到的色谱指纹图谱有16个共有峰,分为3个部分:保留时间0-10min,出现1个峰;保留时间10-15min,出现9个峰,主要特征峰1-7号峰均在此区域,保留时间15-30min出现5个峰。通过与对照品的保留时间、紫外光谱及LC/MS所得分子量信息,1 -7号峰分别鉴定为獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、异荭草苷、当药黄素、异当药黄素、獐牙菜山酮苷;时间15-30min,出现6个峰。通过峰面积及含量测定结果,确定最强峰为1号峰。相同色谱条件下测定了不同工艺提取的獐牙菜提取物及獐牙菜药材的HPLC图谱,其结果与獐牙菜总苷有很好的相关性。结论　獐牙菜总苷的指纹图谱特征性及专属性强,可结合含量测定用于全面控制獐牙菜总苷的质量,确保每批产品的均一性。