软骨生长因子的提取、纯化及生物活性测定

目的　通过从鸡软骨中提取具有生物活性的软骨生长因子 (CDGF) ,为进一步进行体内研究成软骨效应及临床应用打下基础。　方法　采用氯化钠抽提法分离、制备软骨粗提物 ;用肝素 琼脂糖亲合色谱反复层析提纯软骨生长因子 ;以聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染色分析软骨生长因子 ;采用MTT法对CDGF在培养的软骨细胞上进行活性测定。　结果　软骨生长因子能与肝素 琼脂糖紧密结合 ,亲合层析中 ,在 1 4～ 1 8mol/LNaCl缓冲液中洗脱出。通过SDS PAGE凝胶电泳和银染色检测 ,得到分子量为 185 0 0的单一条带 ,高度纯化的CDGF ,其生物活性约 1～ 2ng/ml。　结论　肝素 琼脂糖亲合色谱反复层析 ,可以从鸡软骨中得到活性较高 ,电泳显示单一条带的CDGF。