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中国丁氏双鳍电鳐乙酰胆碱酯酶的制备亲和层析
被引:10
作者:
孙曼霁
高天栋
邢志勇
张翰
周廷冲
机构:
[1] 中国人民解放军军事医学科学院药理毒理研究所,中国人民解放军军事医学科学院药理毒理研究所,中国人民解放军军事医学科学院药理毒理研究所,中国人民解放军军事医学科学院药理毒理研究所,中国人民解放军军事医学科学院药理毒理研究所
来源:
关键词:
乙酰胆碱酯酶;
电器官;
亲和层析;
酶的纯化;
D O I:
10.13865/j.cnki.cjbmb.1985.02.008
中图分类号:
学科分类号:
摘要:
用亲和层析法分离提纯了中国丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱酯酶(AchE,EC3.1.1.7)达到聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。比活性可达78mMAch/小时/毫克蛋白质。每150克电器官制取酶纯品约4毫克。纯化AchE含酸性氨基酸约22%,碱性氨基酸约12%。紫外λmax=280毫微米。圆二色性波谱在209及220毫微米处呈现双负槽。以乙酰胆碱为底物时Km约0.18mM,最适底物浓度1~3mM,高底物浓度出现过量底物抑制效应。酶反应最适pH为7.5—8.0。含牛血清白蛋白或磷脂酰胆碱的电鳐Tris-HCl生理盐水或磷酸缓冲液中酶活性稳定。酶纯品可在-20℃储存,反复冻融及水冻干燥使酶严重失活。
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