氮氧自由基R-1对人肝细胞L-02的辐射防护作用

被引:1
作者
侯知佑
李静
刘军叶
周咏春
刘海强
张琰君
孙晓莉
郭国祯
机构
[1] 第四军医大学军事预防医学系放射医学教研室
关键词
氮氧自由基; 人肝细胞; 辐射防护; γ射线; 凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R144 [放射性的测量和剂量];
学科分类号
100402 ;
摘要
目的探讨氮氧自由基R-1(简称R-1)对人肝细胞L-02的辐射防护作用。方法在L-02细胞培养液中,加入终浓度为0、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32μmol/L的R-1,作用24、48和72h。用MTT法测定R-1的毒性作用,以筛选合适的R-1浓度。后续实验选择0.125、0.25、0.5、1μmol/L4个浓度组检测其防护作用。设终浓度4mmol/L的细胞保护剂WR2721为阳性对照组。采用60Coγ射线照射,吸收剂量为0、1、2、4、8Gy,照射72h后,进行MTT比色法。L-02细胞分为2组:照射前30min加药组和照射后立即加药组。终浓度均为0.25μmol/L,吸收剂量为4Gy,照射后72h进行MTT比色实验。照射后10d,用克隆形成实验检测不同浓度的R-1对L-02细胞活力的影响。选用防护效果最佳的0.25μmol/L浓度对细胞进行预处理,分别在4Gy照射后的24、48和72h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,Hoechst33258荧光染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果当R-1浓度低于1μmol/L时,与0μmol/L组相比,L-02细胞各时间点的吸光度(A)值无明显变化;而浓度高于2μmol/L时,与0μmol/L组相比,其A值随浓度的增高而下降。选用0、0.125、0.25、0.5、1μmol/L的浓度组,与照射组相比,R-1各浓度组的A值和克隆形成率明显提高,其中0.25μmol/L组的作用最明显。与照射组相比,0.25μmol/L预处理组的L-02细胞贴壁好,折光性强,轮廓清晰,凋亡细胞和死亡细胞明显较少。结论 R-1能有效地防护60Coγ射线对L-02细胞的辐射损伤,其防护作用可能与减少细胞凋亡有关。
引用
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