骨细胞分化增殖凋亡及内质网应激信号通路特异性蛋白表达实验研究

目的探讨不同氟浓度处理骨细胞对细胞分化、凋亡、增殖及内质网应激信号通路特异性蛋白的影响。方法培养人成骨细胞染氟模型,按设计时间段分别用0、1、2、4、8、16、20、32 mg/L NaF对细胞进行处理,另选一孔不加NaF处理作为对照组,采用CCK-8检测细胞增殖情况;选取2、8、20 mg/LNaF分别作为低、中、高剂量组,对细胞进行处理,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;采用UPR信号通路PCR A Rrray芯片检测成骨细胞分化相关基因的表达;采用Western blot检测内质网应激信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,2、4、8 mg/LNaF处理后成骨细胞增殖能力明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);16、20、32 mg/L NaF处理后,成骨细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2、8、20 mg/L NaF处理后成骨细胞凋亡率较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);且氟浓度越高,成骨细胞凋亡率越高,差异有统计学意义(P<0.05);2 mg/L NaF处理后成骨细胞分化相关基因表达较对照组显著增强,差异有统计学意义(P<0.05);20 mg/L NaF处理后成骨细胞分化相关基因表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2、8、20 mg/L NaF处理后成骨细胞内质网应激信号通路相关蛋白表达量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度氟对成骨细胞增殖、分化具有促进作用,高浓度氟对成骨细胞增殖、分化具有抑制作用,成骨细胞凋亡率与氟浓度呈正相关,其作用机制可能与内质网应激信号通路相关蛋白PERK、Bip、Xbp1、ATF6的表达有关。