新霉素抗性基因在家蚕中的插入和表达

被引：20

作者：

陈秀

赵昀

张峰

彭卫平

冯晓黎

黄君霆

陆长德

机构：

[1] 中国农业科学院蚕业研究所

[2] 中国科学院上海生物化学研究所

来源：

生物化学与生物物理学报 | 1999年 / 01期

关键词：

家蚕(Bombyx mori．L．)；筛选标记；neoR；转基因蚕;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q784 [基因的重组];

学科分类号：

摘要：

构建含新霉素抗性基因（ｎｅｏｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｇｅｎｅ，ｎｅｏＲ）的重组质粒ｐＦＮ，经ＨｉｎｄＩＩ酶切后，用基因枪将ＤＮＡ片段导入家蚕早期受精卵中（Ｇ０代）。孵化的Ｇ１、Ｇ２代蚁蚕均经含新霉素的人工饲料添食２４ｈ后，筛选出新霉素抗性的个体（能正常生长发育的）改为桑叶饲养。于Ｇ２代的５龄第二天从后部丝腺抽提总ＤＮＡ，再以ｎｅｏＲ的ｃＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测。结果表明ｎｅｏＲ基因已转入家蚕ＤＮＡ中，获得了含ｎｅｏＲ的转基因蚕。

引用

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