带His-tag的乙肝病毒融合抗原在毕赤氏酵母中的表达

被引:3
作者
胡翔华
刘南松
吕红
袁汉英
李育阳
机构
[1] 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海,上海,上海,上海,副教授,上海
关键词
乙肝重组抗原SpreS1; 毕赤氏酵母菌; 镍离子柱; 融合抗原;
D O I
10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2005.04.016
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100108 [医学免疫学];
摘要
乙肝病毒融合抗原SpreS1(简称SS1抗原)较S抗原有更强的免疫原性,可望有更好的临床应用前景.为了便于表达产物的纯化,利用化学合成的寡聚核苷酸链和PCR扩增,在SS1基因的5’端和3’端分别融合了6His-EK和6His的编码序列,将其重组质粒pPIC3.5k-6His-EK-SS1、pPIC3.5k-SS1-6His转化毕赤氏酵母菌GS115,筛选鉴定得到的重组酵母工程菌进行诱导培养,然后采用镍离子柱(Ni-NTABasin)纯化表达产物,纯化的蛋白样品经ELISA效价测定、SDS-PAGE和WesternBlot分析,结果表明融合抗原基因6His-EK-SS1和SS1-6His在毕赤氏酵母中均能表达,纯化的产物仍有免疫原性,所用的纯化方法简便有效.
引用
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