成纤维细胞介导的人白细胞介素6基因疗法的建立及其体内白细胞介素6分泌水平的实验研究

被引：15

作者：

曹雪涛

章卫平

顾申

于益芝

徐志工

杨嗣坤

叶天星

机构：

[1] 第二军医大学免疫学教研室

[2] 第二军医大学免疫学教研室上海

[3] 上海

来源：

中国免疫学杂志 | 1993年 / 06期

关键词：

白细胞介素6; 基因治疗; 成纤维细胞; 移植; 基因转移;

D O I：

暂无

中图分类号：

学科分类号：

摘要：

细胞因子基因治疗是近年来生物治疗的重要进展。本文以人IL-6基因为治疗目的基因,以成纤维细胞为载体细胞,建立了人IL-6基因疗法的实验模型,并动态观察了其体内IL-6分泌水平.将650bp的人IL-6 cDNA 插入到携有NeoR 基因的表达载体BCMGNeo 的Xho I 位点上,对此重组表达载体进行限制性酶切鉴定。用磷酸钙共沉淀法将BCMGNeo-IL-6转入NIH3T3成纤维细胞中,通过G418抗性筛选、有限稀释和上清中IL-6活性的测定,从多株阳性克隆中筛选到一株高分泌IL-6（184.6U/ml）的克隆株。对此阳性克隆进行了Southern 杂交分析。将此阳性克隆体外扩增、包裹入胶原中,然后移植入小鼠腹腔内,可从小鼠血清中（直至移植后15天）检测出IL-6,明成纤维细胞能成功地将IL-6基因导入体内并有效表达,证明该基因疗法是可行的。

引用

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