应用多重引物PCR技术检测O157∶H7毒力基因

目的　对江苏省 6个不同地区不同宿主动物中分离的O15 7∶H7菌株进行毒力基因的检测分析。方法　应用肠出血性大肠杆菌 (EHEC)的多重引物聚合酶链反应 (PCR)方法 ,以志贺样毒素 (SLT2 和SLT1)基因、“粘附抹平”因子eaeA基因和溶血素 (hly)基因为靶基因进行检测。结果　江苏省分离的O15 7∶H7菌株毒力基因携带率为 5 6 .5 % ,不同地区的分离株携带率有所不同 ,个别地区高达 90 %以上 ,有的地区则未检测到带毒力基因的菌株 ,这一结果与不同地区发病率的高低有平行的关系。疾病高发地区 ,菌株毒力基因携带率达 85 .7% (36 /4 2 ) ,低发或散发地区为 5 2 .6 % (10 /19) ,非流行地区为 8.3 % (2 /2 4)。不同的宿主动物分离株其毒力基因携带阳性率从高到低依次为羊 >牛 >猪 >鸡。仅有的一份兔粪便标本分离株也检出毒力基因。菌株毒力基因图谱以SLT2 +eaeA +hly为主 ,占 79.2 % ,其次为SLT2 +SLT1+eaeA +hly和SLT2 +hly ,分别占 16 .6 %和 4.2 % ;有毒力基因的菌株均有hly和SLT2 ,绝大多数菌株有eaeA基因 ,携带SLT1的菌株则较少 ,这与国外一些报道有所不同。结论　O15 7∶H7毒力基因图谱是一个重要的分子流行病学标志 ,应用多重引物PCR方法检测O15 7∶H7毒力基因 ,简便、快速、特异、敏感 ,对流行病学调查分析