p53基因点突变与胃癌细胞恶性程度及临床预后的关系

为进一步明确胃粘膜癌变过程中基因变异的规律，本研究以胃癌手术标本、胃镜活检标本、体外培养细胞为研究体系，利用聚合酶链反应／限制性内切酶长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ／单链构象多态性（ＳＳＣＰ）、ＤＮＡ序列分析、免疫组化及原位杂交多项研究手段，系统研究了６０例胃癌、３０例异型增生和３３例肠上皮化生病变中基因的改变。确定胃癌中存在着多种基因结构及表达的异常，主要表现为Ｈ－ｒａｓ低甲基化、过量表达，ｍｅｔ、ｅｒｂＢ２、ＥＧＦＲ、ａｋｔ２基因扩增。ＡＰＣ、ｐ１６基因缺失和ｐ５３基因点突变，其中ｐ５３基因点突变的频率为５８％，异型增生为２０％，肠上皮化生为６％。突变多发生在第１４３、１７４、１７５、２２３、２４５和２８０位，其中第１７４和２８０位的突变在胃癌实体瘤和培养细胞中都检测到。免疫组化显示ｐ５３染色阳性为５４％，与ＳＳＣＰ得到的结果相似。用染色体原位杂交和Ｎｏｒｔｈｏｒｎ杂交分析发现，ｐ５３基因缺失、低表达在胃癌细胞中也较普遍。显示在恶性度较高的病例中有多个基因的变异，其中在ｐ５３基因有异常的肿瘤多表现为低分化和高转移率，而且病人术后生存期明显低于ｐ５３基因未突变组。这一结果提示ｐ５３基因异常与胃癌的