实时RT-PCR检测西尼罗病毒

被引：7

作者：

邓永强

姜涛

于曼

秦成峰

陈水平

祝庆余

秦鄂德

机构：

[1] 军事医学科学院微生物流行病研究所

[2] 军事医学科学院微生物流行病研究所北京病原微生物生物安全国家重点实验室

[3] 北京病原微生物生物安全国家重点实验室

来源：

中华微生物学和免疫学杂志 | 2005年 / 06期

基金：

国家科技攻关计划;

关键词：

西尼罗病毒; 实时RT-PCR法; 空斑法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R446.5 [微生物学检验];

学科分类号：

100208 ;

摘要：

目的建立西尼罗病毒快速、敏感和特异的实时RTPCR法,用于西尼罗病毒疾病的早期诊断。方法对Vero细胞增殖的西尼罗病毒分别进行常规RTPCR和实时RTPCR法扩增,以PFU/ml为参考标准,比较二者的敏感性和特异性。并用实时RTPCR法检测西尼罗病毒感染的小鼠组织标本。结果采用所建立的实时RTPCR法和常规RTPCR法可分别检测到0.02PFU/ml和2PFU/ml的西尼罗病毒RNA,前者的敏感性比后者高100倍。而对其他黄病毒科成员的检测均为阴性,表明该方法是特异的。采用这种实时RTPCR法可从西尼罗病毒感染小鼠的血液、脾脏、肾脏和脑组织标本中检测出病毒核酸,且在感染后第2天最先自血液和脾脏中检测到病毒,在感染后1周的脑组织中的病毒滴度最高。结论本研究建立的实时RTPCR法具有很高的敏感性和特异性,因此该方法可用于西尼罗病毒疾病的早期监测和流行病学研究。

引用

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